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細胞培養級豬I型膠原（Porcine Type I Collagen）說明書
發布時間：2023/8/4
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細胞培養級豬I型膠原Cell Culture Grade Porcine Type I Collagen Cat#1203
膠原蛋白是脊椎動物體內豐富的蛋白質，存在于皮膚、軟骨、骨、椎間盤、血管、肌腱、韌帶和角膜中，是細胞外基質（ECM）的主要成分。I型膠原由兩條相同的α1鏈和一條不同的α2鏈（1）組成，形成稱為原膠原的三螺旋結構。這種三螺旋構象增加了組織的結構強度和抗酶降解能力，在形成細胞外基質過程中起著關鍵作用。
膠原蛋白有助于促進組織再生和/或靶向藥物釋放，因為它具有低抗原性，低毒、高水溶性、高生物降解性。I型膠原結合整合素，促進細胞遷移、附著以及增殖和分化。盡管通過胃蛋白酶消化從原膠原中去除N-和C-末端原膠原被廣泛用于工業用途，但原膠原作為含有交聯末端肽的天然膠原支架可能是有益的。
Chondrex公司提供酸性I型原膠原溶液，可用于傳統的二維（2D）系統以及三維（3D）凝膠中的支架，用于模擬成纖維細胞和軟骨細胞中的細胞生長。
| 產品名稱 | 可溶性I型膠原 |
| 應用 | 用于傳統的二維（2D）系統以及三維（3D）凝膠中的支架，用于模擬成纖維細胞和軟骨細胞中的細胞生長。 |
| 規格 | 4 mg/ml x 12.5 ml (sterile filtered) |
| 形態 | 溶于0.01M HCL |
| 來源 | 豬 |
| 內毒素 | ＜1 EU/ml |
| 純度 | ＞95% I 膠原 |
| 保存 | 4℃ |
| 穩定性 | 6月 |
| 操作流程 | 包被（注：具體的包被的條件需要根據培養系統優化） 1.用0.02mol/L的鹽酸稀釋4mg/ml的膠原到50-100ug/ml。 2.溫和混勻稀釋后的溶液。 3.取適量的稀釋后的膠原加入孔內或板內。 注：保證整個表面都是包被的。 4. 37℃或室溫孵育1-2小時 5. 棄掉所有溶液。 6.用培養基或者PBS漂洗包被表面。 7.包被好的孔或板2-8℃保存或者空氣中晾干（如果保持無菌） 三維凝膠制備流程：1.用PBS等體積稀釋膠原溶液，終濃度2mg/ml。2.加入適量的稀釋后的膠原到孔內或板內。3.37℃孵育30~60分鐘。4.凝膠可以2-8℃保存或者空氣中晾干（如果保持無菌）。 |
| 參考文獻 | 1. M. Shoulders, R. Raines, Collagen structure and stability. Annu Rev Biochem 78, 929-58 (2009). 2. W. Friess, Collagen--biomaterial for drug delivery. Eur J Pharm Biopharm 45, 113-36 (1998). 3. Taubenberger, M. Woodruff, H. Bai, D. Muller, D. Hutmacher, The effect of unlocking RGD-motifs in collagen I on pre-osteoblast adhesion and differentiation. Biomaterials 31, 2827-35 (2010). 4. D. Gullberg, K. Gehlsen, D. Turner, K. Ahlén, L. Zijenah, et al., Analysis of alpha 1 beta 1, alpha 2 beta 1 and alpha 3 beta 1 integrins in cell--collagen interactions: identification of conformation dependent alpha 1 beta 1 binding sites in collagen type I. EMBO J 11, 3865-73 (1992). 5. J. Bard, E. Hay, The behavior of fibroblasts from the developing avian cornea. Morphology and movement in situ and in vitro. J Cell Biol 67, 400-18 (1975). 6. H. Kleinman, R. Klebe, G. Martin, Role of collagenous matrices in the adhesion and growth of cells. The Journal of cell biology 88, 473-485 (1981). 7. J. Tomasek, E. Hay, Analysis of the role of microfilaments and microtubules in acquisition of bipolarity and elongation of fibroblasts in hydrated collagen gels. J Cell Biol 99, 536-49 (1984). 8. D. Karamichos, N. Lakshman. W.Petroll, Regulation of corneal fibroblast morphology and collagen reorganization by extracellular matrix mechanical properties. Investigative ophthalmology & visual science 48, 5030-5037 (2007). 9. S. Oliveira, R. Ringshia, R. Legeros, E. Clark, M. Yost, et al., An improved collagen scaffold for skeletal regeneration. J Biomed Mater Res A 94, 371-9 (2010). |
