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當(dāng)前位置:首頁技術(shù)文章Lumafluor RetroBeads™逆行熒光示蹤劑

Lumafluor RetroBeads™逆行熒光示蹤劑

更新時間:2025-07-03點(diǎn)擊次數(shù):38

Lumafluor RetroBeads™逆行熒光示蹤劑

RetroBeads逆行熒光示蹤劑

產(chǎn)品描述:

Lumafluor公司 RetroBeads™ 是逆向示蹤領(lǐng)域的原裝微球,也是經(jīng)實(shí)驗(yàn)驗(yàn)證高效可靠的微球產(chǎn)品。綠色紅色熒光 RetroBeads™ 僅由 Lumafluor 供應(yīng)。穩(wěn)定、可靠的逆向示蹤,唯有Lumafluor RetroBeads™ 是您的優(yōu)選。

Lumafluor RetroBeads 核心優(yōu)勢:

1)高度精準(zhǔn)注射—特別適用于精細(xì)神經(jīng)連接研究

2)胞內(nèi)長期穩(wěn)定存在(> 1年)且無毒副作用

3)兼容性強(qiáng):可與多數(shù)順行示蹤劑、原位雜交及免疫組化技術(shù)聯(lián)用

操作流程:

【產(chǎn)品說明】

1.包裝形式:蒸餾水懸浮濃縮液。

2.色微球

1)可直接使用或稀釋。

2)大鼠視覺皮層實(shí)驗(yàn)顯示1:4稀釋不影響標(biāo)記效果。

3初次實(shí)驗(yàn)建議使用原液。

4)可用蒸餾水或標(biāo)準(zhǔn)鹽溶液(NaCl/KCl)稀釋。

3.綠色微球

1)即用型制劑

2)禁止稀釋

【儲存條件】

1.冷藏保存于加濕容器中(防蒸發(fā))

2.嚴(yán)禁冷凍(會導(dǎo)致持久性失效)

3.干燥后不可復(fù)溶

4.正確儲存條件下有效期可達(dá)數(shù)年

【注射方法】

1.推薦方式:

1壓力注射(如1mL漢密爾頓注射器)

2)局部神經(jīng)環(huán)路:30-50納升(30-50μm玻璃微量注射器)

3)常規(guī)逆行示蹤0.1-0.3微升(大口徑針頭)

2.擴(kuò)散特性

1)注射點(diǎn)擴(kuò)散范圍<1mm

2)大范圍標(biāo)記需多點(diǎn)注射

3)不推薦電離子透入法(微珠帶凈負(fù)電荷)

【存活時間】

1.溫血脊椎動物:

1)最短有效標(biāo)記時間:24小時

248小時內(nèi)標(biāo)記強(qiáng)度遞增,此后保持穩(wěn)定。

2.冷血動物:建議初始存活時間設(shè)為1。

3.最長存活期:未明確,但14個月后標(biāo)記仍穩(wěn)定,推測為持久性標(biāo)記。

4.無毒性:未發(fā)現(xiàn)對動物或神經(jīng)元的毒性效應(yīng)。

【固定與處理】

1.標(biāo)準(zhǔn)固定流程:

10.1 M磷酸緩沖液沖洗

24%多聚甲醛(0.1 M磷酸緩沖液,pH 7.4)固定

2.避免戊二醛:會引發(fā)組織自發(fā)熒光,干擾標(biāo)記(綠色微球在戊二醛固定后不可見)。

3.切片處理:

1)冰凍切片收集于磷酸緩沖液,貼附于明膠包被載玻片,空氣干燥。

2充分干燥后,二甲苯透明1分鐘,封片(推薦FluoromountKrystalon)。

4.注意事項(xiàng):

1)短時間(<5分鐘)接觸酒精或二甲苯無害,但長時間會破壞微球。

2)嚴(yán)禁甘油:微球?qū)Ω视兔舾?,會快速褪色(可改用水楊酸甲酯)?/span>

3)避光保存時,標(biāo)記可穩(wěn)定1年以上(但背景熒光可能增強(qiáng))。

4)塑料包埋后無法保留標(biāo)記。

【觀察方法】

1.紅色微球:

染料為羅丹明,適用任何羅丹明熒光濾光片(部分舊款尼康濾光片背景較高,推薦蔡司或徠卡標(biāo)準(zhǔn)濾光片)。

2.綠色微球:

適用寬波段熒光素濾光片(窄波段信號較弱,Lucifer Yellow濾光片背景較高)。

3.抗光漂白:長時間觀察或顯微攝影無明顯褪色。

4.鏡頭選擇:

1)低倍干鏡(如4×、10×)通常無法清晰觀察標(biāo)記。

2)推薦使用10×油鏡(NA  0.4)或更高倍鏡,25×油鏡可顯著提升綠色微球標(biāo)記的清晰度。

3)實(shí)驗(yàn)失敗判斷前,請用油鏡檢查注射位點(diǎn)附近切片(應(yīng)存在大量局部標(biāo)記細(xì)胞)。

綠色微球特別提示

1.年齡影響:

幼年動物標(biāo)記轉(zhuǎn)運(yùn)效率更高,組織自發(fā)熒光更低,建議優(yōu)先選用。

2.降低自發(fā)熒光:

1)使用更薄切片(如30 μm而非40-50 μm)。

2)選用幼年動物。

3)封片后盡快觀察(背景熒光隨時間增強(qiáng))。

產(chǎn)品訂購:

品牌

產(chǎn)品名稱

規(guī)格

Lumafluor

Red Retrobeads

100ul

Lumafluor

Red IX Retrobeads

100ul

Lumafluor

Green IX Retrobeads

100ul

更多產(chǎn)品信息,請垂詢Lumafluor中國區(qū)總代理北京博蕾德生物科技有限公司。




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